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乙醇酸氧化酶活性的测定 乙醇酸氧化酶 （GO）是光呼吸代谢的关键酶，也是光下合成草酸的关键酶，它催化乙醇酸氧化 生成乙醛酸，也可进一步催化乙醛酸氧化生成草酸，两个反应都伴有过氧化氢的产生。测定GO 活性的方法有多种，如氟电极法、盐酸苯肼紫外分光光度法、盐酸苯肼-铁氰化钾比色法、二氯 酚靛酚还原法等，但根据我们多年的研究经验，介绍两种比较精确而实用的方法。 1 仪器设备 冷冻高速离心机、可见光光度计、恒温水浴、秒表。 2 操作方法 2.1盐酸苯肼-铁氰化钾比色法 （Plant CellPhysiol，1978，19：1399） 2.1.1酶提取：称取0.5g 植物叶片，加入5ml100mmol/L 磷酸缓冲液（pH8.0），充分匀浆后用15000 r/min 冷冻离心15min，上清液可作为粗酶液备用。如需进一步提纯 GO，请参考彭新湘和李明 启 （1989，植物生理学报，15：257）。 2.1.2 酶活性测定：向试管中加入0.75ml 100mmol/L 磷酸缓冲液 （pH8.0），0.1ml 1mmol/LFMN， 0.05ml 粗酶液 （可根据不同材料作适当稀释，使最后的OD 读数在0.5 左右为宜），摇匀后在 550 30℃水浴中平衡 10min，然