粮食与食品微生物学 课件 12.1 基因工程及应用.pptx

知识点4：基因工程及应用第五章 微生物遗传、变异和育种 PART 01基因工程的概念 利用分子生物学理论和技术，将目的基因DNA片段经体外操作与载体DNA分子相连接，导入一受体细胞中，进行正常的复制和表达，从而获得定向变异，满足需要。 ——最新的、最有前途的定向育种新技术 受体系统载体系统二、基因工程的操作过程供体系统 1、目的基因的获得（切）基因组文库将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因，称为基因组文库。利用PCR技术：生物体外复制特定DNA片段的基因合成技术mRNA逆转录酶合成cDNA，构建cDNA文库化学法合成：如果基因较小，核苷酸序列又已知，可以通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。 目的基因获得图示 010203用一定的限制性核酸内切酶切割质粒（载体），使之出现一个黏性末端切口。用同种限制酶切割目的基因，产生相同的黏性末端。将目的基因插入质粒切口，加入适量DNA连接酶，使目的基因与质粒（载体）形成重组质粒。2、目的基因与载体的体外重组（接） 概念：将目的基因与载体的重组体导入受体细胞内，且在受体细胞内稳定存在和表达的过程。受体种类微生物：大肠杆菌、酵母菌植物细胞：体细胞、愈伤组织动物细胞：受精卵、胚胎细胞导入感受态微生物细胞方法转化、转染、基因枪、花粉管道法等。感受态细胞：指细菌细胞经过Ca2+处理后，细胞壁透性增强，能够吸收周围环境中DNA分子的生理状态。过程：CaCl2+处理细胞 → 感受态细胞 → 表达载体与感受态细胞混合 → 感受态细胞吸收DNA分子。3、重组体导入受体细胞（转） 导入检测：检测受体细胞中是否含有目的基因——DNA探针法表达检测：检测目的基因是否完成转录，产生mRNA——分子杂交法检测RNA。检测目的基因是否完成表达，翻译成蛋白质——提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原-抗体杂交。表观鉴定：个体生物学水平鉴定，鉴定抗性等。4、鉴定（选）与表达（表） 基因工程的基本操作流程，正确的顺序是（ ）。切—选—转—接—表切—转—接—选—表切—选—接—转—表切—接—转—选—表ABCD提交单选题3分 PART 03基因工程的应用1、工业——改造传统工业发酵菌种（抗生素、氨基酸发酵菌种）改造后的面包酵母可以使麦芽糖酶和二氧化碳量增加，改善面包膨发性能，使面包松软可口。生产大量酶制剂，目前利用基因工程生产的酶类主要有蛋白酶、凝乳酶、纤维素酶、果胶酶、植酸酶以及酶饲料添加剂等传统的工业育种方法已经很难再有大幅度提高 PART 03基因工程的应用2、医疗——基因工程药物——利用大肠杆菌制造胰岛素、干扰素等1982年，美国礼来公司生产的重组人胰岛素Humulin上市，开发了世界上第一个经美国FDA批准上市的基因工程药物成本更低，解决了胰岛素药源不足的问题。基因工程药物的出现为医学上解决各种疑难杂症提供了新的思路。我国在1989年自主研制了重组干扰素a-1b，到目前已有20多种基因工程药物投放市场。 PART 03基因工程的应用3、农业——培育新品种，抗虫、抗病、抗逆、易储、营养利用基因工程技术，生产具有高品质的蛋白质，满足人体对蛋白质的需求。例如，豆类作物中甲硫氨酸的含量很低，但赖氨酸含量很高，而谷类作物则正好相反，通过基因工程技术将谷类植物基因导入豆科植物，开发甲硫氨酸含量高的转基因大豆。利用基因工程技术还可生产独特的食品香味剂和风味剂，如香草素、可可香素、菠萝风味剂等 PART 03基因工程的应用4、环保——利用基因工程可获得同时能分解多种有毒物质的新型菌种基因工程菌在环境中重金属离子的处理成为研究的热点环境保护是人类可持续生存与发展的重要课题。一些能快速分解吸收工业有害废料、生物转化工业有害气体以及全面净化工业和生活废水的基因工程微生物种群已从实验室走向三废聚集地。基因工程菌也被用于降解废水中的有机污染物。运用基因工程技术构建出特效菌株，该菌株兼具了高降解性、高适应性和高絮凝性的特点，对苯环污染物的降解率均达87%以上。 微生物育种定向性，由低到高排列的是（ ）。基因工程——诱变育种——基因重组基因工程——基因重组——诱变育种诱变育种——基因重组——基因工程基因重组——诱变育种——基因工程ABCD提交单选题3分 PART 04基因编辑技术及应用概念——一种新兴的比较精确的能对生物体基因组特定目标基因进行修饰的一种基因工程技术基因编辑以其能够高效率地进行定点基因组编辑， 在基因研究、基因治疗和遗传改良等方面展示出了巨大的潜力2018年11月，中国科学家贺建奎在深圳宣布，他们团队创造的一对名为露露和娜娜的基因编辑婴儿已顺利诞生。这对双胞胎的一个基因经过修改，使她们出生后就能天然抵抗