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克氏原螯虾家系建立技术研究 克氏元宝虾，俗称淡水虎虾，属于节肢动物门、甲壳素、足食、兵役科、元宝虾等。原产于北美洲, 自20世纪30年代传入我国后, 现已广泛分布于我国, 并形成了可供利用的天然种群, 特别是在长江中、下游地区生物种群量较大, 已成为我国一种重要的淡水虾类资源 家系选育是选择育种的方法之一, 水产养殖动物的家系选育由于其养殖特点和繁殖生物学特性而有较大困难, 其中鱼类的家系选育进展最好, 已取得很大的成果 由此可见, 进行一个物种的家系选育首先要解决该物种家系构建的技术, 而物种不同相应的构建方法也会存在差异, 关于克氏原螯虾家系建立和选育的研究尚未见文献报道, 同时家系也是进行遗传分析的重要材料, 对于深入分析不同亲本的遗传背景和构建遗传连锁图谱十分重要。为此, 本试验开展了克氏原螯虾家系建立及早期生长比较的研究, 以期为克氏原螯虾大规模家系选育奠定基础。 1 材料和方法 1.1 克氏原螯虾亲本选择 试验在浙江省淡水水产研究所夹山漾基地进行, 采用太湖地区群体作为克氏原螯虾基础群体, 从安吉养殖户购得, 选择个体较大、附肢完整、活力较强的虾作为亲本。 1.2 幼虾的养殖管理 1.2.1配组及亲本培育于2011年9月5日至9月18日运用定向交尾法 1.2.2抱卵虾挑选和孵化配组完成后, 每隔10 d检查一次雌虾抱卵情况, 发现抱卵虾后, 将抱卵虾挑出, 在45 L圆形桶中进行培养, 每桶放一个弧形瓦片, 水深约30 cm, 不间断充气, 水温保持在20~ 24℃。 1.2.3幼虾培育当孵化桶 (45 L小桶) 中有部分幼虾离开母体时, 将抱卵雌虾、小虾和瓦片一并转至500 L方桶 (桶内放瓦片作为虾巢, 水深约20 cm) , 2~3 d后, 待小虾自动离开母体时, 对小虾进行计数, 对母本进行测量, 并将准备好的网片放入大桶, 以供小虾躲避和攀爬。幼虾培育的饵料以罗氏沼虾粉状料添少许螺旋藻粉、蜕壳素等配制而成。幼虾培育期间每隔2 d吸污1次, 同时定期补充新水。 1.2.4幼虾的生长比较经60 d的幼虾培育后, 对各家系的虾进行标准化养殖和生长对比试验, 主要处理为选取亲本明确、幼虾尾数多于200个、孵出时间相近的家系用于生长比较的试验, 试验在温室内500 L大桶内进行, 水深50 cm, 水温25℃, 放养密度为150尾/桶, 桶内放瓦片作为虾巢, 每天投喂罗氏沼虾中虾料, 搭配少量螺蛳肉和带鱼等, 不间断充气, 每隔2 d吸污1次, 并适时增添新水。 将虾养至约5.5月龄 (2012年4月) , 对克氏原螯虾的生长性状进行测量和比较, 每个家系随机取30尾虾, 测量指标为体重、体长。 1.3 数据处理方法 用Excel和SAS8.0统计分析软件进行数据处理, 运用简单相关和多元偏相关分析进行指标间的相关性分析, 采用ANOVA进行方差分析并通过Duncan法进行多重比较检验差异显著性。 2 结果与分析 2.1 抱卵虾的养殖和孵化 本实验共配组48个, 亲本培育成活率约85%。 于9月28日至10月28日, 共进行了5次抱卵虾检查 (9月28日、10月8日、10月13日、10月18日、10月28日) , 获得105尾抱卵虾, 其中属于父系半同胞家系的为92尾。平均抱卵率 (30 d) 为44.2%, 平均每个配组产生2.18尾抱卵虾, 单个配组最高抱卵率为100%, 表明1尾雄虾在1个月内能够为5尾雌虾进行自然受精。在水温20~25℃的条件下, 抱卵虾经17~30 d孵化出苗, 共有77尾抱卵虾成功孵化出虾苗, 孵化成功率为72.74%。经30 d培育, 幼体规格达1.8 cm, 幼虾培育成活率为96.25%±2.58% (n=8) 。 2.3 不同放养密度与2平台成活率比较 养殖初期 (2个月) , 不同家系的幼虾放养密度是不同的 (见表1) , 对其中54个家系的放养密度与2月龄培育成活率进行统计分析, 得出2月龄幼虾培育成活率为82.63%±10.76% (n=54) , 对培育密度 (尾·桶 2.4 家系生长比较 本实验选择23个全同胞家系 (其中半同胞家系15个) , 在温室内进行幼虾养殖, 养殖的成活率为39%±8% , 各家系间养殖成活率的变异系数为20.51%, 其中家系37养殖成活率最高 (51.33%) , 家系36养殖成活率最低 (23.33%) 。不同家系幼虾生长比较结果具体见表2。 表2中体长多重比较表明, 生长最快的3个家系是家系36、家系15和家系8, 生长最慢的3个家系是家系37、家系38和家系17。体重多重比较表明, 生长最快的3个家系是家系36、家系13和家系15, 生长最慢的3个家系是家系37、家系38和家系17。多数家系幼虾生长差异不明显, 但生长最快与生长最慢的