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中药血清药理学研究概述

中医血清药理学是近年来发展起来的一种科学方法。日本科学家田代真一于1987年首次提出了这一问题。中药血清药理学是为了研究中药复方制剂而诞生的一种新的体外实验方法,是在以前体外实验的基础上加以改进形成的,即将受试药物经口给予动物后以含药血清代替中药粗提物作为药物源加入离体反应系统中研究其药理作用。它不仅具有体外实验的优点,如条件可控性强,可在细胞、亚细胞水平进行超微、生化、受体、基因等方面的研究,揭示药物作用机理较为深入,重复性好,使用材料少等,而且有其适用于中药及其复方制剂研究的独特之处:因为中药尤其是复方制剂的化学成分极其复杂,经过煎煮或其他制备过程,再经口服以后在体内的代谢等发生了一系列变化,有的是药物本身发挥作用,有的是经过肝脏代谢的产物发挥作用,有的是通过第二信使间接起作用。因此,以中药粗提物的体外实验结果来评价药物的体内效应是不客观的,也是不确切的。而含药血清能更好地反映药物在体内环境中产生药理效应的真实过程,在理论上更具科学性和真实性。近年来,许多专家和学者对中药血清药理学进行了深入的研究,取得了可喜的成绩,积累了一定经验,为中药作用机理、中药复方化学成分、中药药动学的深入研究奠定了基础。本文综述了国内中药血清药理学的研究方法和应用研究现状。

1目前，中医血清药理学方法的研究

1.1动物的生物学活性

一般多选用大鼠、家兔、豚鼠等动物来制备含药血清,但不同种属动物的血清成分不同,因此在选择动物时应尽量选用与人类生物学活性近似的物种。刘成海等提出在体外培养实验中宜采用同一种单一血清,既为细胞提供营养,又为药物提供载体,还避免了由血清引起的多种干扰作用,一般应首选家兔和大鼠。

1.2多次给药法

有7~10d法(1次/d,连用7~10d),3次给药法(连续给药3次,第1、2次间隔20h,第2、3次间隔4h),2次给药法(第1次给药后2h,再以相同剂量重复1次)等。各种给药方式都是为了达到稳态血药浓度,从而便于药物作用机理的研究。严格地说,应该根据药物半衰期给药,连续5~7个半衰期达到稳态血药浓度,但由于中药及其复方成分复杂,半衰期很难测定,所以7~10d给药为权宜之计。如果对药物血清时效关系进行研究,应另当别论。

1.3按新理念、新药的使用,将含药血清冻干粉加入反应系统

在实验中,由于含药血清加入体外反应系统后,浓度将被稀释,因而达不到在体内条件下的药物浓度,反应系统可能出现假阴性反应。针对此种情况,李仪奎等提出按新药药理研究的技术要求设计剂量给药,将含药血清制成冷冻干燥粉(冻干粉),以冻干粉形式加入反应系统,使之达到所需要的浓度。刘平认为给药剂量应以整体模型动物的有效剂量(即为临床成人剂量的8~18倍量)为宜。

1.4最佳含药血清

大鼠一般给药1~2h后血药浓度达到峰值,此时的血清为最佳含药血清。超过1天后,大部分药物成分已经被代谢和排泄,药物的直接作用消失,此时的血清为机体功能状态血清。当然还要考虑例外,因此最好能通过预实验来确定最佳采血时间。

1.5大鼠肝贮脂细胞内3h-tdr-1的血清分布

含药血清是否需要灭活,许多学者观点不一。有的将含药血清经56℃,30min灭活,也有的不经灭活,直接进行体外实验。刘成海等发现正常大鼠血清无论灭活与否均可维持大鼠肝贮脂细胞的贴壁生长,两组大鼠血清对肝贮脂细胞内3H-TdR掺入的影响无明显差异,所以刘氏主张血清经56℃,30min灭活,可排除非药理性干扰。但徐海波等认为含药血清不宜灭活,因为血清经灭活以后,其中含有的机体在药物作用下产生的内源性有效成分将减少或丧失,生物活性降低,会影响药理实验结果,而且与体内实验和临床用药情况也不相符。对于血清非药理性干扰,可采取空白对照来衡定和排除,而细胞培养中的微生物感染,也可用微孔滤膜除菌法来防止。至于哪种方法更为合理,还有赖于今后血清药理实验结果来证实。

2中医与血清药理学的应用研究

2.1单核细胞内生致热原生成的机制

杨奎等应用中药血清药理学方法用含黄芩、含香薷、含羌活胜湿汤、含九味羌活丸等的血清分别对家兔单核细胞内生致热原产生过程中单核细胞内DNA、蛋白质合成速率及Ca2+内流的影响机制进行了初步探讨。实验结果表明,中药血清药理学方法在进行中药时效关系研究方面有着较大的优势。

2.2麻黄安全性因素对大鼠贮脂细胞功能的影响

刘成海、季光等分别采用中药血清药理学研究方法观察了扶正化瘀方对培养大鼠贮脂细胞功能的影响,结果表明,扶正化瘀方既能促进肝细胞增殖,又可显著抑制细胞胶原生成率,在一定程度上体现了该方扶正化瘀的双重作用。

2.3血府逐瘀浓缩丸的有效成分

张群豪等观察了血府逐瘀丸对实验性动脉粥样硬化家兔主动脉平滑肌细胞(SMC)增殖的影响。结果表明血府逐瘀浓缩丸在体内外均