罗氏试剂盒说明书 Anti-TSHR 05056845001_en-dtp.docVIP

05056845001V2 促甲状腺素受体抗体 2008-11, V 7中文 PAGE 8 / NUMPAGES 8 Elecsys和cobas e 分析仪190 100测试 本试剂盒可使用的分析仪 Elecsys 2010 MODULAR ANALYTICS E170 cobas e 411 cobas e 601 · · · · 中文 主要用途 Elecsys Anti-TSHR试剂盒用于体外定量测定人体血清中TSH（促甲状腺激素）受体抗体，其使用人甲状腺刺激性单克隆抗体。抗-TSH受体测定有助于鉴别诊断Graves病。 Elecsys和cobas e 免疫分析仪运用电化学发光免疫测定法“ECLIA”进行测定。 临床应用1,2,3,4,5,6 Graves 病中甲状腺机能亢进（自身免疫性甲亢）由TSH受体（TSHR）的自身免疫抗体引起，这些TSHR抗体的测定可用于疾病诊断和管理。TSH受体抗体具有和TSH相似的甲状腺刺激功能。由于其不受负反馈系统的控制，刺激性甲状腺作用常导致Graves病的临床甲亢症状。 TRAb测定指征包括： 自身免疫性甲亢的诊断或排除，以及与功能自主性甲状腺多发结节的鉴别诊断。TRAb存在提示患者甲亢是由于自身免疫引起而不是毒性结节性甲状腺肿。由于Graves病的治疗不同于其他甲亢的治疗，因此早期TRAb测定非常有用。 监测Graves病患者治疗和复发情况，对临床治疗管理具有重要的指导作用7,8,9。Graves病抗甲状腺药物治疗期间TRAb浓度常下降。药物治疗后TRAb低浓度或消失可能提示疾病缓解，可以考虑终止治疗。 怀孕最后三个月期间的TRAb测定。因为TRAb是IgG-类抗体，可通过胎盘并引起新生儿甲状腺疾病。因此有甲状腺疾病史的患者在怀孕期间测定TRAb对于评估新生儿甲状腺疾病危险程度非常重要。 目前临床常规TRAb测定由第二代试剂盒完成，其使用带有人或猪TSHR固定化抗体的镀板或试管技术10,11。这种TSH结合抑制试剂测定血清TRAb抑制标记TSH与固定化TSH受体之间结合的能力。如果试剂使用人重组或猪TSH受体，则Graves病患者治疗中灵敏度和预测值不受影响12,13。 随着人甲状腺刺激性单克隆抗体（M22）14,15的获得，开发了一种新的TRAb测定系统，即利用患者血清自身抗体抑制标记人甲状腺刺激性抗体（而不是标记TSH）与TSH受体之间的结合16。 Elecsys 抗-TSHR试剂盒通过可溶猪TSH受体和生物素化抗猪TSH受体C-端鼠单克隆抗体免疫复合体以及钌复合物标记的人单克隆自身抗体M22进行测定。 检测原理 “竞争”法，总检测时间：27分钟。 第一次孵育：50μl血清标本和预处理缓冲液（PT1）以及预处理试剂缓冲液（PT2）一起孵育，PT1和PT2由可溶猪TSH受体（pTSHR）的免疫复合物前体物和生物素化抗猪TSH受体鼠单克隆抗体组成。患者血清中TRAb与TSH受体复合物发生反应。 第二次孵育：在孵育液中加入缓冲液，TRAb进一步与TSH受体反应。 第三次孵育：加入链霉亲和素包被的微粒和钌复合物标记的人甲状腺刺激性单克隆抗体（M22）后，通过对被标记的M22结合的抑制能力测定结合的TRAb。此完整的复合体在生物素和链亲和素相互作用下形成固相。 将反应液吸入检测池中，检测池中的微粒通过电磁作用吸附在电极表面。未结合的物质通过Procell除去。在电极上加以一定的电压，使复合体化学发光，用光电倍增器检测发光的强度。 通过检测仪的定标曲线得到最后的检测结果，定标曲线是通过2定标点和不同试剂浓度获得的主曲线生成。 试剂－工作溶液 M 链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖）一瓶， 6.5ml。链霉亲和素包被的微粒：0.72mg/ml，防腐剂。 R1 缓冲液（灰色瓶盖），一瓶， 7 ml。磷酸盐缓冲液：20mmol/L，PH值7.4；稳定剂，防腐剂。 R2 钌复合物标记的抗－TSHR（黑色瓶盖）一瓶， 7ml。钌复合物标记抗TSHR单克隆抗体（人）：约0.3mg/L；磷酸盐缓冲液：20mmol/L，PH值7.4；稳定剂， 防腐剂。 定标液 Cal1 抗TSHR定标液1（白色瓶盖），1瓶（冻干粉），2.0 ml：抗TSHR抗体（人），约1.0 IU/L人血清基质。 Cal2 抗TSHR定标液2（黑色瓶盖），1瓶（冻干粉），2.0 ml：抗TSHR抗体（人），约25 IU/L人血清基质 预处理Rackpack PT1 预处理缓冲液（黑色瓶盖），1瓶， 4 ml。磷酸盐缓冲液：20mmol/L，PH值7.4；稳定剂，防腐剂。 PT2 空瓶（白色瓶盖），用于预处理缓冲液（PTB）重新溶解制备预处理试剂（P