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凤丹的药材品种类型及其质量比较研究
牡丹皮来自水生祖先的干燥根皮,在中国广泛使用。生长于安徽铜陵凤凰山一带的凤丹P.ostiiT.HongetJ.XZhang已有近500年的历史,是中药丹皮中的最优品种类型,其根皮以“条粗长直、肉厚粉足、木心细、亮心多、久贮不变色、久煎不发烂”而成为著名的道地药材,山东、湖南、重庆及安徽亳州等地均有大面积引种栽培。
近年来随着微量元素对人体的药理作用得到证实,微量元素也成为药材道地性研究的热点,但是多数研究仅从微量元素的药效方面来分析其对道地药材质量的影响,忽略了微量元素与有机成分的关系。本研究通过对安徽省铜陵县凤凰山、安徽省亳州市、山东省菏泽市、湖南省邵阳县、重庆市垫江县5个产区的同一种质(均为凤丹品种类型)的药材外观和化学成分的考察,比较其质量差异,揭示“道地药材”的质优所在。采用电感耦合等离子体-原子发射光谱(ICP-AES)对药材中22种微量元素含量进行测定,对各微量元素含量和丹皮各质量指标作相关性分析,探索微量元素对丹皮药材质量形成的影响。
1材料和方法
1.1品种品系鉴定
于2006年9,10月在安徽省铜陵县凤凰山、安徽省亳州市谯城区十九里镇、山东省菏泽市小留镇、重庆市垫江县太平镇和湖南省邵阳县郦家坪镇5个产地的四年生凤丹种植基地采集植株样(编号分别为ATD,ABD,SHD,CDD,HSD),每地随机采集5株,样品经南京农业大学园艺学院王广东副教授鉴定,为凤丹品种类型。去掉地上部分,用清水洗净根系表面泥土,测量主根长度、径粗和木心粗度后,以蒸馏水、去离子水分别快速淋洗3遍,剥下根皮,60℃烘干,粉碎,过60目尼龙筛。
1.2方法
1.2.1末端各部位木心粗度的测定
分别测其主根长度、粗度(离根茎交接至末端的1/3处横切)、木心粗度(与测粗度的位置对应),韧粗=(粗度-木心粗)/2,韧木比=韧粗/木心粗。
1.2.2色谱-质谱条件
参照2005年版《中国药典》,甲醇超声提取,HPLC测定,DIONEXSUMMITP680A液相色谱仪(美国戴安公司),色谱柱KromasilC18(4.6mm×250mm,0.5μm),流动相甲醇-水(45∶55),柱温28℃,进样量20μL,检测波长274nm。
1.2.3提取和测定糖含量
具体参照文献,苯酚-硫酸法测定。
1.2.4微量元素检测
浓HNO3-HClO4(5∶1)消煮,采用电感耦合等离子体-原子发射光谱仪IrisAdvantageICP-AES(美国热电公司)测定铝(Al)、砷(As)、硼(B)、钙(Ca)、镉(Cd)、钴(Co)、铬(Cr)、铜(Cu)、铁(Fe)、钾(K)、锂(Li)、镁(Mg)、锰(Mn)、钼(Mo)、镍(Ni)、磷(P)、铅(Pb)、硫(S)、硒(Se)、硅(Si)、钛(Ti)、锌(Zn)等22种微量元素含量。
1.2.5数据分析
所得数据采用SPSS13.0分析软件进行相关性分析。
2结果与分析
2.1种植物生长指标不同
5个不同产地丹皮的各质量指标见表1,经方差分析,在外观上,铜陵道地丹皮与其他产地丹皮差异不大,仅山东菏泽与重庆垫江韧/木比在5%水平上有显著差异;各地产丹皮的活性成分含量有一定差异,其中,铜陵凤凰山的丹皮药材中的丹皮酚含量极显著高于其他产区的丹皮,多糖含量除与亳州的无明显差异外,也极显著高于其他3个产区的丹皮。这为几百年来传统观念所认为的“铜陵凤凰山道地丹皮质量最佳”提供了科学理论依据,也说明丹皮道地药材的品质优良并不一定表现在外观性状上,更主要的是表现在其内部活性成分含量上。
2.2铜绿糖复合皮的表征
各产地丹皮药材中微量元素含量结果见表2,经方差分析表明,铜陵道地丹皮中的Cd,Cu,Mn,Ni,Pb,Ti,Zn含量均极显著高于其他4个产地丹皮,可以作为优质丹皮药材的特征元素组合。其中Cd和Pb是对人体有害的元素,铜陵丹皮中Cd含量是其他4个产地药材均值的6.9倍,Pb含量也达到3倍,但参照药用植物及制剂出口绿色行业标准并未见超标。Cu,Mn,Ni,Ti,Zn也达到其他4个产地药材均值的1.4~3.7倍。铜陵道地丹皮中有害元素As含量也较高,但也远远低于限量(As≤2.0mg·kg-1)。Cr,Mo,Se含量在5个产地丹皮中均未表现出差异,这是否可作为凤丹品种的微量元素特征还有待考证。
2.3铜道地丹皮中多糖含量的相关性
丹皮酚含量和各元素含量的相关系数见表3,与丹皮酚
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