进出口食品中覆盆子酮、罗汉果糖苷V的测定 液相色谱法.docVIP

ICS67.050 X 04 SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T XXXXX—XXXX 进口食品中覆盆子酮、覆盆子酮葡萄糖甙、罗汉果糖苷V的测定 高效液相色谱法 Determination of Raspberry keton, Raspberry ketone glucoside and Mogroside V in foodstuffs for exports —HPLC method XXXX - XX - XX发布 XXXX - XX - XX实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布 前言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草进口食品中覆盆子酮、覆盆子酮葡萄糖甙覆盆子酮葡萄糖甙、、、、、覆盆子酮葡萄糖甙覆盆子酮葡萄糖甙覆盆子酮葡萄糖甙C10H12O2，分子量191.2，纯度大于等于99%。 覆盆子酮葡萄糖甙分子式C16H22O7164.2，纯度大于等于99%。 罗汉果糖苷 V（Morgroside V）：CAS号88901-36-4，分子式60H102O29，分子量1287.43，纯度大于等于97.5%。 覆盆子酮标准储备溶液：准确称取适量的覆盆子酮标准品（精确至0.01?mg），用甲醇溶解并加入100μL盐酸，配制成100 μg／mL的标准储备溶液，-18℃下保存。 覆盆子酮葡萄糖甙?mg），用甲醇溶解，配制成1000 μg／mL的标准储备溶液，-18℃下保存。 罗汉果糖苷 V标准储备液：准确称取适量的罗汉果糖苷V标准品（精确至0.01?mg），用甲醇溶解，配制成1000 μg／mL的标准储备溶液，-18℃下保存。 混合标准工作溶液：根据需要分别取适量覆盆子酮、覆盆子酮葡萄糖甙50 mL。 离心管：具塞，玻璃，10 mL。 试样制备与保存 在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生待测物含量的变化。取代表性样品500 g，用粉碎机粉碎。混匀，均分成两份作为试样，分装，密闭，于 0℃~4℃保存。 分析步骤 提取与净化 称取5 g（精确至0.01 g）试样于50 mL离心管（5.8）中，如果为干燥样品则加5~10?mL水，视具体样品而定，混匀后，浸泡1 h。加入乙腈（4.1）20 mL，旋涡混匀1min，在40℃以下超声提取30 min，取出后4000 r/min离心10min。取上清液用0.2 μm（4.22）滤膜过滤，高效液相色谱测定。 高效液相色谱参考条件 液相色谱柱： YMC-Pack ODS-AQ C18, 150 mm×4.6 mm（i.d.），粒度3?μm，或性能相当者。 柱温：30℃。 流动相：乙腈-水，梯度洗脱程序见表1。 表1 流动相洗脱梯度表 时间(min) 流速 (mL／min) 乙腈（%） 水（%） 1 Initial 0.70 10 90 2 5 0.70 10 90 3 15 0.70 40 60 4 17 0.70 40 60 5 18 0.70 10 90 6 24 0.70 10 90 进样量：20 μL。 检测波长：200 nm。 标准曲线的配制 以标准中间溶液稀释覆盆子酮和覆盆子糖苷浓度在0.05、0.1、0.2、0.5、1、2、10 mg/L，罗汉果苷0.5、1、2、5、10、20、50 mg/L，不过原点做标准工作曲线，宜现用现配。 定量覆盆子酮葡萄糖甙 空白试验 除不加试样外，均按上述操作步骤进行。 结果计算和表述 高效液相色谱法测定试样中覆盆子酮、覆盆子酮葡萄糖甙…………………………（1） 式中： Xi——试样中目标物的含量，单位为毫克每千克（mg／kg）； Ci——从标准曲线上得到的被测组分溶液浓度，单位为微克每毫升（μg／mL）； V——样品提取液总体积，单位为毫升（mL）； m——最终样品溶液所代表试样的质量，单位为克（g）。 测定低限、回收率 测定低限 本方法对覆盆子酮和覆盆子糖苷的检测限均为1 mgkg，罗汉果苷的检测限为10 mgkg。 添加回收率 本方法的添加浓度和回收率范围见附录 B 中表 B.1。 覆盆子酮、覆盆子酮葡萄糖甙 图A.1 标准工作溶液的色谱图 （覆盆子糖苷：12.659min；罗汉果苷：15.550 min；覆盆子酮：17.396 min；进样量：20μL） （资料性附录）覆盆子酮、覆盆子酮葡萄糖甙覆盆子酮葡萄糖甙样品 添加浓度（mg/kg） 覆盆子酮回收率范围（%） 覆盆子酮葡萄糖甙回收率范围（%） 添加浓度（mg/kg） 罗汉果糖苷 V回收率范围（%） 饼干 1 86.7～98.3 85.0～98.3 10 78.3～91.7 2 88.0～100.0 80.0～90.4 20 90.4～98.4 5 93.2～99.6 85.2～99.2