蒲地蓝消炎口服液中黄芩苷的含量测定方案.pdfVIP

蒲地蓝消炎口服液中黄芩苷的含量测定方案 一、设计背景 蒲地蓝消炎口服液是医保乙类的处方药，价格亲民效果俱佳。蒲地蓝消炎口服液中主 要的成分有蒲公英、苦地丁、板蓝根和黄芩。其性状为棕红色至深棕色的液体、气微香， 味甜、微苦。其中，组方中的蒲公英起到清热解毒，利尿散结的作用；苦地丁主要有清热 解毒的疗效；板蓝根用于辅助清热解毒和凉血利咽；黄芩则有止血、清热燥湿和泻火解毒 的作用。蒲地蓝消炎口服液临床上主要用于治疗风热型的感冒，对于扁桃体炎、咽炎、疖 肿、牙龈肿痛、伤风、流黄鼻涕、脓痰、咳嗽、发烧尤其是发高热，都有很好的功效和作 用。通常 1 天可以服用 3-4 次，但是服药的过程中，不可吃辛辣和过于刺激性的食物，对 于脾弱虚寒的患者应该谨慎服用，因为其具有退热的效果，所以对于体温过低者也不宜服 用。鉴于蒲地蓝消炎口服液在临床上应用广泛，其质量控制显得尤为重要。而黄芩苷 （化 学结构式见下图 1）是蒲地蓝消炎口服液中的主要有效成分，具有利尿消肿，解毒，排脓 等功效。本方案选择黄芩苷作为指标成分，设计一种测定蒲地蓝消炎口服液中黄芩苷含量 的方法，为蒲地蓝消炎口服液的质量控制提供相关参考资料。 图 1 黄芩苷 二、设计依据 经查阅 “中国知网”有关黄芩苷的含量测定相关的文献资料及 2020 年版 《中国药典》 有关黄芩项下的资料可知，黄芩药材或其他复方制剂中黄芩苷的含量测定方法主要有荧光 分光光度法、高效液相色谱法或超高效液相色谱法。其中，李祥昀及李道祥等人采用荧光 分光光度法检测了黄芩中黄芩苷含量，并验证了方法的可靠性。沈丹萍和陈康等人采用高 效液相色谱法同时测定了三九胃泰颗粒中包括黄芩苷在内的 8 个成分的含量，方法中以乙 腈和 0.05%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱，检测波长为 250nm。林珊和陈达鑫等人则采 用 UPLC 的方法测定了清达颗粒和清眩降压汤中黄芩苷的含量，方法中考察了乙腈-00.05% 磷酸溶液和乙腈-水的流动相系统对测定的影响，考察了检测波长的选择，最终选择以乙 腈-0.05%磷酸为流动相进行梯度洗脱，以280nm 作为检测波长测定黄芩苷的含量，验证了 方法的有效性。《中国药典》（2020 年版）中，也采用高效液相色谱法测定的黄芩苷的含 量，以甲醇-水-磷酸作为流动相，检测波长为 280nm。综合相关参考资料可知，高效液相 色谱法比荧光分光光度法的分离能力更强，而检测成本比超高效液相色谱法要低，故本方 案拟采用高效液相色谱法测定蒲地蓝消炎口服液中黄芩苷的含量。 三、设计方案 1.仪器与试剂 （1）仪器 Waters 2695 高效液相色谱仪 （二元梯度洗脱高压输液泵、紫外检测器和色谱数据处 理系统)、色谱柱、超声波仪、微量注射器，研钵、称量瓶、量瓶、分析天平 (感量 0.01mg)、 滤纸、漏斗、微孔滤膜等。 图2 Waters2695 高效液相色谱仪 （2）试剂 蒲地蓝消炎口服液，购自云南白药集团股份有限公司，规格为 10ml/支；黄芩苷的对 照品购于中国食品药品检定研究院，纯度为 95.4% （供含量测定用）；甲醇 （分析纯，天 津市康科德科技有限公司）；乙腈 （色谱纯，科密欧化学试剂有限公司）；磷酸 （分析纯， 天津市康科德科技有限公司）；水为娃哈哈水 （杭州娃哈哈集团有限公司）； 2.溶液的制备 （1）对照品溶液的制备 取黄芩苷对照品 5mg，装入 100ml 的量瓶当中，加入甲醇约 40ml 振摇使黄芩苷溶解， 继续加甲醇稀释至刻度线，即得每 1ml 中含黄芩苷约为 50 μg 的对照品溶液，待用。 （2）供试品溶液的制备 取符合装量差异项下的蒲地蓝消炎口服液 5 支，均置于同一干净烧杯中，摇匀，精密 量取蒲地蓝消炎口服液 1ml，置于 100ml 的容量瓶当中，用甲醇稀释到刻度线，缓慢均匀 摇晃数次，放置备用，即得供试品溶液。 （3）阴性样品溶液的制备 除不加黄芩，其余按蒲地蓝消炎口服液的处方制备不含黄芩的阴性样品，按供试品溶 液的制备方